Съдържание
Грам оцветяване или просто Грам е бърза и проста техника, която има за цел да диференцира бактериите според характеристиките на клетъчната им стена след излагане на различни багрила и разтвори.
По този начин, чрез оцветяване по Грам, е възможно да се провери, освен формата на бактериите, цвета, който те придобиват, и този резултат е важен за определяне на други стратегии за идентифициране на бактериалните видове и за лекаря да посочи превантивно лечение според микроскопски наблюдавани характеристики.
Оцветяването по Грам обикновено се извършва рутинно в лабораторията и е част от изпита за бактериоскопия. Разберете какво е бактериоскопия и как се прави.
Как се прави оцветяване по Грам
Грам оцветяването е бърз, практичен и евтин метод за идентифициране на бактерии, отговорни за инфекции, като е полезен за лекарите да посочат превантивно лечение на инфекцията, която може да се появи, тъй като са известни специфичните характеристики на тези групи бактерии,
Оцветяването по Грам се извършва в 7 основни стъпки, но протоколът може да варира в зависимост от лабораторията:
- Поставете няколко колонии от бактерии върху пързалката, като добавите капка вода, за да улесните хомогенизирането на колониите;
- Оставете го да изсъхне малко и острието може бързо да премине през пламъка, за да благоприятства изсушаването, но е важно да се обърне внимание на температурата, тъй като ако температурата е твърде висока, е възможно да има промяна в структурата на бактериите, което може да повлияе на резултата Изпитът;
- Когато предметното стъкло изсъхне, покрийте с виолетово кристално багрило и го оставете да действа за около 1 минута;
- Измийте предметното стъкло с струя течаща вода и покрийте пързалката с лугол, който има за цел да фиксира синьото багрило, и го оставете да действа в продължение на 1 минута. И двата вида бактерии могат да абсорбират комплекса, образуван от багрилото и лугола, като стават сини;
- След това измийте пързалката с течаща вода и нанесете 95% алкохол, оставяйки да действа 30 секунди. Алкохолът е отговорен за разтварянето на липидната мембрана, която образува грам-отрицателни бактерии, и по този начин премахва комплекса, образуван между багрилото и лугола, обезцветявайки тези бактерии. Въпреки това, в случай на грам-положителни бактерии, алкохолът дехидратира клетъчната стена на грам-положителните бактерии, като кара порите да се свиват и ги прави непропускливи;
- След това трябва да се измие отново под течаща вода и да се покрие пързалката с второто багрило, фуксин или сафранин и да се остави да действа 30 секунди;
- След това измийте пързалката под течаща вода и я оставете да изсъхне при стайна температура.
Веднага след като предметното стъкло изсъхне, е възможно да се постави капка потапящо масло и да се наблюдава предметното стъкло под микроскопа със 100-кратна цел, като е възможно да се провери наличието или отсъствието на бактерии, както и наличието на дрожди и епителни клетки.
За какво е
Грам оцветяването има за основна цел да диференцира бактериите според характеристиките на клетъчната стена и общата морфология. По този начин, според характеристиките, наблюдавани под микроскопа, бактериите могат да бъдат класифицирани в:
- Грам-положителни бактерии, които се визуализират със син цвят поради факта, че не се обезцветяват от алкохол, тъй като имат по-дебела клетъчна стена и порите им се свиват, когато са изложени на лугол;
- Грам-отрицателни бактерии, които се визуализират с розов / лилав цвят поради факта, че са обезцветени от алкохол и оцветени от сафранин или фуксин.
След разглеждане на бактериите под микроскоп е възможно да бъдат проведени допълнителни тестове в лабораторията, за да се идентифицират видовете бактерии. Чрез Грама и връзката с признаци и симптоми, представени от лицето, лекарят може да посочи превантивно лечение, докато се получат резултатите от по-специфични тестове, тъй като по този начин е възможно да се намали скоростта на бактериална репликация и да се предотвратят усложнения.